人白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)試劑盒說明書

● 試劑盒操作步驟如下： ● 1.用TBS或PBS制備蛋白樣品的稀釋液。稀釋度要取決于樣品中存在的抗原濃度。由于抗原濃度通常未知，因此有必要檢測(cè)寬范圍的稀釋度。 2.制備硝酸纖維素膜，用鉛筆標(biāo)上每個(gè)待測(cè)一抗/二抗的濃度。所需轉(zhuǎn)印膜的數(shù)量取決于待篩查的一抗和/或二抗有多少種不同的稀釋濃度。通常來說，一抗要檢測(cè)一到兩個(gè)稀釋度，而二抗要檢測(cè)兩到三個(gè)稀釋度。 3.將硝酸纖維素膜放在濾紙上,將抗原稀釋液點(diǎn)在膜上。每個(gè)點(diǎn)的體積越少越好(1-5μl)，以保證點(diǎn)盡可能地小。如果需要使用5μl以上的樣品，在點(diǎn)完一次后,干燥2-5分鐘,再點(diǎn)一次。讓膜干燥10-15分鐘，或直至無(wú)可見水分。 4.用封閉液封閉膜上的非特異性位點(diǎn)，室溫震蕩孵育1h。 5.用包含1/10體積封閉液的洗滌液稀釋一抗，并加到膜上，室溫震蕩孵育1h。 6.用洗滌液洗膜4次，每次5分鐘，用盡可能大體積的洗脫液。 7.用包含1/10體積封閉液的洗滌液稀釋二抗，并加到膜上，室溫震蕩孵育1h。 8.用洗滌液洗膜4次，每次5分鐘，用盡可能大體積的洗脫液。 9.準(zhǔn)備底物工作液。白介素1ELISA試劑盒廠家制備足夠體積的工作液,以確保印跡點(diǎn)完全濕潤(rùn),且印跡點(diǎn)在孵育過程中不會(huì)干。 10.將膜放在底物工作液中孵育5分鐘。 11.將膜取出,放在塑料布或其它防護(hù)膜上。 12.蛋白一側(cè)朝上,將印跡貼到膠片上,曝光30-60秒。為獲得*結(jié)果,曝光時(shí)間可能不同。如果*次曝光不夠,再試試2-5分鐘。 13.在一張優(yōu)化好的印跡膜上,底物產(chǎn)生的信號(hào)可能會(huì)持續(xù)6-24小時(shí),這取決于具體的產(chǎn)品。

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人白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)試劑盒，

● 試劑盒操作步驟如下： ● 1.用TBS或PBS制備蛋白樣品的稀釋液。稀釋度要取決于樣品中存在的抗原濃度。由于抗原濃度通常未知，因此有必要檢測(cè)寬范圍的稀釋度。 2.制備硝酸纖維素膜，用鉛筆標(biāo)上每個(gè)待測(cè)一抗/二抗的濃度。所需轉(zhuǎn)印膜的數(shù)量取決于待篩查的一抗和/或二抗有多少種不同的稀釋濃度。通常來說，一抗要檢測(cè)一到兩個(gè)稀釋度，而二抗要檢測(cè)兩到三個(gè)稀釋度。 3.將硝酸纖維素膜放在濾紙上,將抗原稀釋液點(diǎn)在膜上。每個(gè)點(diǎn)的體積越少越好(1-5μl)，以保證點(diǎn)盡可能地小。如果需要使用5μl以上的樣品，在點(diǎn)完一次后,干燥2-5分鐘,再點(diǎn)一次。讓膜干燥10-15分鐘，或直至無(wú)可見水分。 4.用封閉液封閉膜上的非特異性位點(diǎn)，室溫震蕩孵育1h。 5.用包含1/10體積封閉液的洗滌液稀釋一抗，并加到膜上，室溫震蕩孵育1h。 6.用洗滌液洗膜4次，每次5分鐘，用盡可能大體積的洗脫液。 7.用包含1/10體積封閉液的洗滌液稀釋二抗，并加到膜上，室溫震蕩孵育1h。 8.用洗滌液洗膜4次，每次5分鐘，用盡可能大體積的洗脫液。 9.準(zhǔn)備底物工作液。白介素1ELISA試劑盒廠家制備足夠體積的工作液,以確保印跡點(diǎn)完全濕潤(rùn),且印跡點(diǎn)在孵育過程中不會(huì)干。 10.將膜放在底物工作液中孵育5分鐘。 11.將膜取出,放在塑料布或其它防護(hù)膜上。 12.蛋白一側(cè)朝上,將印跡貼到膠片上,曝光30-60秒。為獲得*結(jié)果,曝光時(shí)間可能不同。如果*次曝光不夠,再試試2-5分鐘。 13.在一張優(yōu)化好的印跡膜上,底物產(chǎn)生的信號(hào)可能會(huì)持續(xù)6-24小時(shí),這取決于具體的產(chǎn)品。

檢測(cè)范圍：歡迎QQ或電話索取原版說明書.
產(chǎn)品規(guī)格：96T/48T。
主要成分：酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
經(jīng)營(yíng)種類：進(jìn)口分裝和原裝、國(guó)產(chǎn)
性狀：盒裝液體
試劑盒保存：2-8℃低溫保存。
標(biāo)本：血清、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
ELISA常用的方法：雙抗體夾心法、間接法、競(jìng)爭(zhēng)法以及BAS-ELISA等。
預(yù)期應(yīng)用：ELISA法定量測(cè)定血清、、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中的含量。

引起 ELISA 測(cè)定結(jié)果與文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)不一致的原因主要有三點(diǎn)，試劑因素、標(biāo)本因素和操作因素。 試劑因素：1. 試劑應(yīng)選擇靈敏度高、特異性好、穩(wěn)定性好、批間差小、操作方便的試劑。 2.不同廠家的試劑一定不能混用，包括底物和洗滌液。由于校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)有差異，還有抗體、檢測(cè)方法、試劑、交叉反應(yīng)等因素都會(huì)導(dǎo)致對(duì)樣本的檢測(cè)結(jié)果不一致。如：有的廠家酶標(biāo)板孔間 CV 值大于 20%，標(biāo)記酶的活性及顯色液的穩(wěn)定性比較差，使用劣質(zhì)的試劑必然導(dǎo)致結(jié)果的假陽(yáng)性或假陰性。 3. 要注意試劑的批號(hào)和出廠日期，雖然試劑的有效期多為 1 年，好選擇剛出廠的試劑盒。 4. 避免選擇假的 ELISA 試劑盒。有些廠家為夸大生產(chǎn) ELISA 的指標(biāo)范圍，用一種指標(biāo)來冒充其它指標(biāo)，造成各種種屬、各種指標(biāo)都可以做的假象。 標(biāo)本因素和操作因素： 血清是常用的 ELISA 標(biāo)本，血漿一般可視為與血清同等的標(biāo)本，標(biāo)本引起的假陽(yáng)性和假陰性結(jié)果主要是干擾性物質(zhì)所致，分為內(nèi)源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)兩種。 內(nèi)源性物質(zhì):有人認(rèn)為大約 40%的人血清標(biāo)本中含有非特異性干擾物質(zhì)，可以不同程度影響檢測(cè)結(jié)果。常見的干擾物質(zhì)有：類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、嗜異性抗體、嗜靶抗原自身抗體、醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠 Ig (s) 抗體、交叉反應(yīng)物質(zhì)和其它物質(zhì)等。 外源性物質(zhì):外源性物質(zhì)常常是由于用于 ELISA 測(cè)定的血標(biāo)本的采集、貯存等不當(dāng)所致。如標(biāo)本溶血、標(biāo)本被細(xì)菌污染、標(biāo)本貯存過久、標(biāo)本凝集不全和采血管中添加物等影響。

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編輯：小檀20181218