酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)已經(jīng)成為實(shí)驗(yàn)室常用的檢測蛋白含量變化的實(shí)驗(yàn)技術(shù),常用的檢測方法是用抗原包被孔板,然后用一抗和二抗檢測抗原的變化。這里使用兩種抗體的原因一方面是信號放大的需要,另一方面是要減少成本。假如每種抗體都用酶或者熒光素標(biāo)記的話,那將會需要多少種標(biāo)記的抗體呢?而且可以肯定價(jià)格一定不菲。而用標(biāo)記二抗的方法就可以大大減少需要標(biāo)記抗體的數(shù)目,同時(shí)也能提高標(biāo)記抗體的效用,這樣就能用盡量少的標(biāo)記抗體滿足盡量多的實(shí)驗(yàn)要求。
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檢測范圍:歡迎QQ或電話索取原版說明書. 產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T。 主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等 經(jīng)營種類:進(jìn)口分裝和原裝、國產(chǎn) 性狀:盒裝液體 試劑盒保存:2-8℃低溫保存。 標(biāo)本:血清、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。 ELISA常用的方法:雙抗體夾心法、間接法、競爭法以及BAS-ELISA等。 預(yù)期應(yīng)用:ELISA法定量測定血清、、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中的含量。
引起 ELISA 測定結(jié)果與文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)不一致的原因主要有三點(diǎn),試劑因素、標(biāo)本因素和操作因素。 試劑因素:1. 試劑應(yīng)選擇靈敏度高、特異性好、穩(wěn)定性好、批間差小、操作方便的試劑。 2.不同廠家的試劑一定不能混用,包括底物和洗滌液。由于校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)有差異,還有抗體、檢測方法、試劑、交叉反應(yīng)等因素都會導(dǎo)致對樣本的檢測結(jié)果不一致。如:有的廠家酶標(biāo)板孔間 CV 值大于 20%,標(biāo)記酶的活性及顯色液的穩(wěn)定性比較差,使用劣質(zhì)的試劑必然導(dǎo)致結(jié)果的假陽性或假陰性。 3. 要注意試劑的批號和出廠日期,雖然試劑的有效期多為 1 年,好選擇剛出廠的試劑盒。 4. 避免選擇假的 ELISA 試劑盒。有些廠家為夸大生產(chǎn) ELISA 的指標(biāo)范圍,用一種指標(biāo)來冒充其它指標(biāo),造成各種種屬、各種指標(biāo)都可以做的假象。 標(biāo)本因素和操作因素: 血清是常用的 ELISA 標(biāo)本,血漿一般可視為與血清同等的標(biāo)本,標(biāo)本引起的假陽性和假陰性結(jié)果主要是干擾性物質(zhì)所致,分為內(nèi)源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)兩種。 內(nèi)源性物質(zhì):有人認(rèn)為大約 40%的人血清標(biāo)本中含有非特異性干擾物質(zhì),可以不同程度影響檢測結(jié)果。常見的干擾物質(zhì)有:類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、嗜異性抗體、嗜靶抗原自身抗體、醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠 Ig (s) 抗體、交叉反應(yīng)物質(zhì)和其它物質(zhì)等。 外源性物質(zhì):外源性物質(zhì)常常是由于用于 ELISA 測定的血標(biāo)本的采集、貯存等不當(dāng)所致。如標(biāo)本溶血、標(biāo)本被細(xì)菌污染、標(biāo)本貯存過久、標(biāo)本凝集不全和采血管中添加物等影響。
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編輯:小檀20181220
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