引起 ELISA 測(cè)定結(jié)果與文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)不一致的原因主要有三點(diǎn),試劑因素、標(biāo)本因素和操作因素。 試劑因素:1. 試劑應(yīng)選擇靈敏度高、特異性好、穩(wěn)定性好、批間差小、操作方便的試劑。 2.不同廠家的試劑一定不能混用,包括底物和洗滌液。由于校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)有差異,還有抗體、檢測(cè)方法、試劑、交叉反應(yīng)等因素都會(huì)導(dǎo)致對(duì)樣本的檢測(cè)結(jié)果不一致。如:有的廠家酶標(biāo)板孔間 CV 值大于 20%,標(biāo)記酶的活性及顯色液的穩(wěn)定性比較差,使用劣質(zhì)的試劑必然導(dǎo)致結(jié)果的假陽性或假陰性。 3. 要注意試劑的批號(hào)和出廠日期,雖然試劑的有效期多為 1 年,好選擇剛出廠的試劑盒。 4. 避免選擇假的 ELISA 試劑盒。有些廠家為夸大生產(chǎn) ELISA 的指標(biāo)范圍,用一種指標(biāo)來冒充其它指標(biāo),造成各種種屬、各種指標(biāo)都可以做的假象。 標(biāo)本因素和操作因素: 血清是常用的 ELISA 標(biāo)本,血漿一般可視為與血清同等的標(biāo)本,標(biāo)本引起的假陽性和假陰性結(jié)果主要是干擾性物質(zhì)所致,分為內(nèi)源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)兩種。 內(nèi)源性物質(zhì):有人認(rèn)為大約 40%的人血清標(biāo)本中含有非特異性干擾物質(zhì),可以不同程度影響檢測(cè)結(jié)果。常見的干擾物質(zhì)有:類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、嗜異性抗體、嗜靶抗原自身抗體、醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠 Ig (s) 抗體、交叉反應(yīng)物質(zhì)和其它物質(zhì)等。 外源性物質(zhì):外源性物質(zhì)常常是由于用于 ELISA 測(cè)定的血標(biāo)本的采集、貯存等不當(dāng)所致。如標(biāo)本溶血、標(biāo)本被細(xì)菌污染、標(biāo)本貯存過久、標(biāo)本凝集不全和采血管中添加物等影響。
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【注意事項(xiàng)】 1.請(qǐng)按照操作步驟進(jìn)行測(cè)試,操作時(shí)請(qǐng)勿觸摸試紙顯示區(qū)。 2.如購買時(shí)發(fā)現(xiàn)過期,破損,污染,無效的產(chǎn)品,請(qǐng)到購買處更換。 3.本品為一次性產(chǎn)品,請(qǐng)勿重復(fù)使用。 4.出現(xiàn)陽性結(jié)果,建議用本卡復(fù)查一次。 5.自來水、蒸餾水或去離子水不能作為陰性對(duì)照。 6.由于樣品(尿和飼料)的差異,有的檢測(cè)線可能偏淡或偏暗,但只要出現(xiàn)條帶,就可判定為陰性結(jié)果。 7.若需直接檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品,請(qǐng)用PBS或PB配制。
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編輯:小檀20181224
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