ELISA應用:ELISA檢測技術早在19世紀70,80年代就開發(fā)出來用于替代放射性同位素標記技術用于研究蛋白質間的相互作用(配體-受體,抗原-抗體),到如今已經接近50年的歷史了。這個技術從科研的角度來說已經不具備**性,沒有太多的價值,不值得專門進行研究,更多的是一個使用的工具。工業(yè)應用落后于基礎研究,ELISA技術在制藥領域的應用隨著近20年生物制藥領域的迅猛發(fā)展展現(xiàn)著越來越多的使用價值,當然ELISA的應用情況也越來越復雜,這樣的復雜性也使得早期的基礎研究并不再具有很好的指導意義,ELISA方法濫用錯用往往導致實驗結果出現(xiàn)系統(tǒng)性偏差,影響實驗結果的真實性,做出錯誤的選擇。本文的寫作目的旨在作為文獻之外關于ELISA實際應用的一個總結,反補基礎研究的不足,使得該技術更具使用價值。
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檢測范圍:歡迎QQ或電話索取原版說明書. 產品規(guī)格:96T/48T。 主要成分:酶標板,試劑,標準品等 經營種類:進口分裝和原裝、國產 性狀:盒裝液體 試劑盒保存:2-8℃低溫保存。 標本:血清、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。 ELISA常用的方法:雙抗體夾心法、間接法、競爭法以及BAS-ELISA等。 預期應用:ELISA法定量測定血清、、細胞培養(yǎng)上清或其它相關生物液體中的含量。
●外源性物質 ●: 外源性物質經常是由于用于ELISA測定的血標本的采集、貯存等不當所致。如標本溶血、標本被污染、標本貯存過久、標本凝集 不全和采血管中添加物等影響。 (1)標本溶血 由于各種人為原因引起的標本溶血,均可因紅細胞破壞溶解時釋放出大量具有過氧化物酶活性的血紅蛋白,在以辣根過氧化物酶為標記的 ELISA測定中,會導致非特異性顯色,干擾測定結果。為克服上述干擾作用,標本采集時必須注重避免溶血。 (2)標本受細菌污染 因菌體中可能含有內源性辣根過氧化物酶,因此,被細菌污染的標本同溶血標本一樣,亦可產生非特異性顯色而干擾測定結果。 (3)標本保存不當 在冰箱中保存過久的標本,血清中IgG可聚合成多聚體、AFP可形成二聚體,在間接法ELISA測定中會導致本底過深、甚至造成 假陽性;標本放置時間過長(如**以上),有時抗原或抗體免疫活性減弱,亦可出現(xiàn)假陰性。為克服上述干擾,ELISA測定的血清 標本宜為新鮮采集;如不能立即測定,5天內測定的血清標本可存放于4℃,1周后測定的血清標本應低溫凍存;凍存后融解的標本,蛋白質局部濃縮,分布不均,應充分混合后再測定,但混勻時應輕柔,不可強烈振蕩。 (4)標本凝集不全 在沒有促凝劑和抗凝劑存在的情況下,正常血液采集后1/2~2h開始凝固,18~24h完全凝固。臨床檢驗工作中,有時為了爭取時間快速檢測,常在血液還未開始凝固時即強行離心分離血清,此時的血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在ELISA測定過程中可以形成 肉眼可見的纖維蛋白塊,易造成假陽性結果;這類情況于次日復查時因血凝已完全,血清中不再有纖維蛋白原存在,故復查結果變?yōu)殛幮?。為避免上述干擾作用,解決的辦法好是血液標本采集后必須使其充分凝固后再分離血清,或標本采集時用帶分離膠的采血管或于采血管中加入適當?shù)拇倌齽? (5)標本管中添加物質的影響 抗凝劑(如肝素,EDTA)、酶抑制劑(如NaN3可抑制ELISA系統(tǒng)中辣根過氧化物酶活性)及快速分離血清的分離膠等均對ELISA測定有一定干擾作用。 綜上所述,對臨床檢驗ELISA測定中出現(xiàn)的假陽性或假陰性結果,在考慮試劑因素和操作因素之外,更多的應從標本因素方面進行分 析,并應采取相應措施排除干擾作用,從而為臨床提供正確可靠的檢測結果。 公司的服務挺好,挺專業(yè)的,周期不延期。滿意
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編輯:小檀20181226
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