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HT-22小鼠海馬神經(jīng)元細胞
貨號:BY-0671
品牌:乾思細胞
規(guī)格:T25瓶
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HT-22 小鼠海馬神經(jīng)元細胞簡介
HT-22 細胞系是一種永生化的小鼠海馬神經(jīng)元細胞系,來源于 HT-4 細胞系的亞克隆。其親本細胞系 HT-4 則源自具有溫度敏感的 SV40 T 抗原的小鼠神經(jīng)元組織的永生化。
細胞特性
形態(tài)與生長方式
:在正常狀態(tài)下,HT-22 細胞呈神經(jīng)細胞樣形態(tài),并在培養(yǎng)器皿表面貼壁生長,細胞形態(tài)飽滿,有著明顯的神經(jīng)元特征,比如具有較長的軸突和樹突狀分支,相互交織形成復雜的網(wǎng)絡結(jié)構(gòu)。
谷氨酸敏感性
:HT-22 細胞對谷氨酸表現(xiàn)出高度敏感,是研究谷氨酸誘導的神經(jīng)元細胞毒性的理想模型系統(tǒng)。谷氨酸作為一種主要的興奮性神經(jīng)遞質(zhì),正常水平時參與大腦認知、學習和記憶等諸多功能。然而,當谷氨酸水平過高時,會導致神經(jīng)細胞過度興奮,*終引發(fā)細胞損傷或死亡,這一過程與多種神經(jīng)退行性疾病相關(guān),如阿爾茨海默氏病、亨廷頓舞蹈癥、帕金森氏病等,以及脊髓損傷和多發(fā)性硬化癥等其他病癥。
培養(yǎng)條件與操作
培養(yǎng)基
:通常使用普通 DMEM 培養(yǎng)基,添加 10% 胎牛血清(FBS)來提供細胞生長所需的各種營養(yǎng)成分和生長因子,同時加入 1% 雙抗(青霉素 - 鏈霉素)以抑制細菌污染。
培養(yǎng)環(huán)境
:將細胞置于 37℃、含 5% 二氧化碳的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),以維持細胞生長的適宜溫度和 pH 環(huán)境。
細胞傳代
:當細胞密度達到 80%-90% 時需進行傳代。首先棄去舊的培養(yǎng)基,用不含鈣、鎂離子的 PBS 沖洗細胞 1-2 次,加入適量 0.25% Trypsin-0.53mM EDTA 消化液,37℃消化 1-2 分鐘,在顯微鏡下觀察到細胞大部分變圓并開始脫落時,迅速加入少量培養(yǎng)基終止消化,輕輕吹打使細胞脫落并分散成單細胞懸液,離心后棄去上清液,加入新的培養(yǎng)基重懸細胞,并按 1:2 - 1:6 的比例接種到新的培養(yǎng)器皿中繼續(xù)培養(yǎng)。
細胞凍存
:在細胞生長狀態(tài)良好時可進行凍存。先將細胞消化成單細胞懸液,離心收集細胞,用含有 10% DMSO 的凍存液重懸細胞,調(diào)整細胞密度不低于 1x10?/ml,將細胞懸液分裝入凍存管,做好標識后,先置于程序降溫盒中,放入 - 80℃冰箱 2 小時,之后轉(zhuǎn)移至液氮罐中長期儲存。
科研應用
由于其對氧化應激敏感以及谷氨酸毒性敏感的特性,HT-22 細胞在神經(jīng)退行性疾病研究中發(fā)揮著重要作用??蒲腥藛T可以通過給予細胞特定損傷刺激,模擬疾病中神經(jīng)元的氧化應激損傷過程,觀察細胞凋亡、自噬等變化,進而探究發(fā)病機制以及篩選潛在治療藥物。同時,在神經(jīng)藥理學研究領域,該細胞系也用于評估藥物對神經(jīng)元的直接作用,研究藥物的神經(jīng)毒性或神經(jīng)保護機制,為新藥研發(fā)提供重要參考依據(jù)。
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