簡述利用平板培養(yǎng)法檢測微生物的方法以及ATP熒光法檢測餐具表面潔凈度的方法? ATP熒光檢測法:ATP是三磷酸腺苷的英文縮寫,是生物能量轉(zhuǎn)化產(chǎn)物,存在于所有活的細胞體中。當ATP接觸到熒光素酶后,就會發(fā)生反應產(chǎn)生出光,物體表面殘留的食物和微生物越多,ATP也就越多,發(fā)出的熒光也就越強,采用熒光光度計,可將這種光的強度加以記錄。在被檢物體表面10cm×10cm的區(qū)域內(nèi),用拭搽拭抹采樣,按儀器使用說明書操作記錄測試結(jié)果。
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檢測范圍:歡迎QQ或電話索取原版說明書. 產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T。 主要成分:酶標板,試劑,標準品等 經(jīng)營種類:進口分裝和原裝、國產(chǎn) 性狀:盒裝液體 試劑盒保存:2-8℃低溫保存。 標本:血清、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。 ELISA常用的方法:雙抗體夾心法、間接法、競爭法以及BAS-ELISA等。 預期應用:ELISA法定量測定血清、、細胞培養(yǎng)上清或其它相關生物液體中的含量。
●分子實驗中常用生化試劑原理匯總● 1.溶菌酶:它是糖苷水解酶,能水解菌體細胞壁的主要化學成分肽聚糖中的β-1,4糖苷鍵,因而具有溶菌的作用。當溶液中pH小于8時,溶菌酶作用受到抑制。葡萄糖:增加溶液的粘度,維持滲透壓,防止DNA受機械剪切力作用而降解。 EDTA:(1)螯合Mg2+、Ca2+等金屬離子,抑制脫氧核糖核酸酶對DNA的降解作用(DNase作用時需要一定的金屬離子作輔基);(2)EDTA的存在,有利于溶菌酶的作用,因為溶菌酶的反應要求有較低的離子強度的環(huán)境。 2.NaOH-SDS液: NaOH:核酸在pH大于5,小于9的溶液中,是穩(wěn)定的。但當pH>12或pH<3時,就會引起雙鏈之間氫鍵的解離而變性。在溶液II中的NaOH濃度為0.2mo1/L,加抽提液時,該系統(tǒng)的pH就高達12.6,因而促使染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性。 SDS:SDS是離子型表面活性劑。它主要功能有:(1)溶解細胞膜上的脂質(zhì)與蛋白,因而溶解膜蛋白而破壞細胞膜。(2)解聚細胞中的核蛋白。(3)SDS能與蛋白質(zhì)結(jié)合成為R-O-SO3-…R+-蛋白質(zhì)的復合物,使蛋白質(zhì)變性而沉淀下來。但是SDS能抑制核糖核酸酶的作用,所以在以后的提取過程中,必須把它去除干凈,防止在下一步操作中(用RNase去除RNA時)受到干擾。 3. 3mol/L NaAc(pH4.8)溶液: NaAc的水溶液呈堿性,為了調(diào)節(jié)pH至4.8,必須加入大量的冰醋酸。所以該溶液實際上是NaAc-HAc的緩沖液。用pH4.8的NaAc溶液是為了把pH12.6的抽提液,調(diào)回pH至中性,使變性的質(zhì)粒DNA能夠復性,并能穩(wěn)定存在。而高鹽的3mol/L NaAc有利于變性的大分子染色體DNA、RNA以及SDS-蛋白復合物凝聚而沉淀之。前者是因為中和核酸上的電荷,減少相斥力而互相聚合,后者是因為鈉鹽與SDS-蛋白復合物作用后,能形成較小的鈉鹽形式復合物,使沉淀更完全。 4.為什么用無水乙醇沉淀DNA?用無水乙醇沉淀DNA,這是實驗中常用的沉淀DNA的方法。乙醇的優(yōu)點是可以任意比和水相混溶,乙醇與核酸不會起任何化學反應,對DNA很**,因此是理想的沉淀劑。 DNA溶液是DNA以水合狀態(tài)穩(wěn)定存在,當加入乙醇時,乙醇會奪去DNA周圍的水分子,使DNA失水而易于聚合。一般實驗中,是加2倍體積的無水乙醇與DNA相混合,其乙醇的終含量占67%左右。因而也可改用95%乙醇來替代無水乙醇(因為無水乙醇的價格遠遠比95%乙醇昂貴)。但是加95%的乙醇使總體積增大,而DNA在溶液中有一定程度的溶解,因而DNA損失也增大,尤其用多次乙醇沉淀時,就會影響收得率。折中的做法是初次沉淀DNA時可用95%乙醇代替無水乙酵,后的沉淀步驟要使用無水乙醇。也可以用0.6倍體積的異丙醇選擇性沉淀DNA。一般在室溫下放置15-30分鐘即可。
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編輯:小檀20181220
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